Введен в действие
Приказом Федерального агентства
по техническому регулированию
и метрологии
от 5 мая 2016 г. N 289-ст
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ВИТАМИНА A
МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
ЧАСТЬ 2
ИЗМЕРЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ БЕТА-КАРОТИНА
Foodstuffs. Determination of vitamin A by high performance
liquid chromatography. Part 2. Measurement of
(EN 12823-2:2000, IDT)
ГОСТ EN 12823-2-2014
МКС 67.050
Дата введения
1 июля 2017 года
Предисловие
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"
Сведения о стандарте
1 ПОДГОТОВЛЕН Республиканским государственным предприятием "Казахстанский институт стандартизации и сертификации" Комитета технического регулирования и метрологии и Техническим комитетом по стандартизации ТК 71 "Экологическая безопасность сырья, материалов, веществ и сооружений" на основе собственного перевода немецкоязычной версии стандарта, указанного в пункте 5.
2 ВНЕСЕН Комитетом технического регулирования и метрологии Министерства индустрии и новых технологий Республики Казахстан
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 25 июня 2014 г. N 45-2014)
За принятие проголосовали:
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Армения AM Минэкономики Республики Армения
Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь
Казахстан KZ Госстандарт Республики Казахстан
Киргизия KG Кыргызстандарт
Молдова MD Молдова-Стандарт
Россия RU Росстандарт
Таджикистан TJ Таджикстандарт
4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 5 мая 2016 г. N 289-ст межгосударственный стандарт ГОСТ EN 12823-2-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2017 г.
5 Настоящий стандарт идентичен европейскому стандарту EN 12823-2:2000 "Продукты пищевые. Определение содержания витамина A методом жидкостной хроматографии высокого разрешения. Часть 2. Измерение содержания бета-каротина" ("Foodstuffs - Determination of vitamin A by high performance liquid chromatography - Part 2: Measurement of ", IDT).
Европейский стандарт EN 12823-2:2000 подготовлен Техническим комитетом CEN/TC 275 "Анализ пищевых продуктов. Горизонтальные методы", Европейского комитета по стандартизации (CEN).
Официальный экземпляр европейского стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, и европейского и международных стандартов, на которые даны ссылки, имеются в Федеральном информационном фонде технических регламентов и стандартов.
Сведения о соответствии ссылочных европейских региональных стандартов межгосударственным стандартам приведены в дополнительном приложении ДА
6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает метод определения полного в пищевых продуктах при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ).
2 Нормативные ссылки
Для применения настоящего стандарта необходимы следующие ссылочные нормативные документы. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного документа, для недатированных ссылок применяют последнее издание ссылочного документа (включая все его изменения):
EN ISO 3696:1987 Water for analytical laboratory use. Specification and test methods (Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний).
ISO 5555:2001 Animal and vegetable fats and oils. Sampling (Масла и жиры животные и растительные. Отбор проб).
EN 12823-1:2000 Foodstuffs. Determination of vitamin A by high performance liquid chromatography. Measurement of all-trans-retinol and 13-cis-retinol (Продукты питания. Определение содержания витамина A методом жидкостной хроматографии высокого разрешения. Часть 1. Измерение содержания полного транс-ретинола и 13-цис-ретинола).
3 Сущность метода
Сумму изомеров в испытуемом растворе пробы определяют методом ВЭЖХ с помощью спектрофотометрического детектора в видимом диапазоне. Экстракт, полученный после омыления, описанного в EN 12823-1, может использоваться для количественного анализа. Информация по идентификации на основании времени удерживания и определению по площади или высоте пиков указана в [3], [7].
Может быть также использован метод внутреннего стандарта, если соответствующие проверки полноты обнаружения подтверждают, что поведение внутреннего стандарта и аналита тождественно.
4 Реактивы
Для испытаний используют реактивы гарантированной чистоты и воду не ниже 1-й степени чистоты в соответствии с EN ISO 3696.
4.1 Метанол.
4.2 Этанол абсолютный, объемной долей 100%.
4.3 Этанол, объемной долей 96%.
4.4 Сульфат натрия (сернокислый натрий) безводный.
4.5 Растворы гидроксида калия (KOH) для омыления с соответствующими массовыми концентрациями, например: KOH = 50 г/100 см3 или 60 г/100 см3 или спиртовые растворы, например: 28 г KOH в 100 см3 смеси этанол/вода (в объемном соотношении 9:1).
4.6 Антиоксиданты: аскорбиновая кислота (АК), аскорбат натрия, сульфид натрия (Na2S), бутилгидрокситолуол, пирогаллол или гидрохинон.
4.7 Растворители и экстрагенты: ацетонитрил, диэтиловый эфир (без пероксидов), диизопропиловый эфир, петролейный эфир (кипящий при температуре от 40 °C до 60 °C), н-гексан, дихлорметан, тетрагидрофуран, толуол или их смеси.
4.8 Раствор ацетата аммония в метаноле, например, c(CH3CO2NH4) = 0,05 моль/дм3.
4.9 Триэтиламин.
4.10 Растворители, выполняющие роль подвижной фазы в ВЭЖХ, например, смесь ацетонитрил (см. 4.7) - метанольный раствор ацетата аммония (см. 4.8) - дихлорметан (см. 4.7) (75:20:5 в объемном соотношении), содержащий 0,1% (по массе) бутилгидрокситолуола (см. 4.6) и 0,05% (по массе) триэтиламина (см. 4.9). Информация о подвижных фазах для альтернативных систем ВЭЖХ приведена в приложении C.
4.11 Образцы сравнения
4.11.1 Общие положения
Чистота образцов сравнения и варьируется между 90% и 100%. Поэтому необходимо определить массовую концентрацию градуировочного раствора спектрофотометрическим методом (см. 4.12.2).
4.11.2 , M (C40H56) = 536,85 г/моль, с массовой долей не менее 95%.
4.11.3 , M (C40H56) = 536,85 г/моль, для качественного анализа.
4.11.4 Ликопин, M (C40H56) = 536,85 г/моль, для качественного анализа.
4.12 Приготовление исходного раствора
4.12.1 Исходный раствор
Растворяют 3 мг образца сравнения (см. 4.11.2) в 20 см3 дихлорметана, тетрагидрофурана или толуола (см. 4.7), помещая мерную колбу на 30 с в ультразвуковую баню (см. 5.6).
Разбавляют этот раствор н-гексаном до объема 100 см3.
Разбавляют 10,0 см3 полученного раствора н-гексаном до 100 см3.
1 см3 этого раствора содержит 3 мкг в смеси н-гексан/дихлорметан (98:2) (по объему), смеси н-гексан/тетрагидрофуран (98:2) (в объемном соотношении) или н-гексан/толуол (98:2) (в объемном соотношении).
Хранят исходный раствор в защищенном от света месте при температуре ниже 4 °C.
4.12.2 Проверка концентрации и чистоты
Измеряют оптическую плотность исходного раствора (см. 4.12.1) при длине волны 453 нм на спектрофотометре (см. 5.1). Вычисляют массовую концентрацию c, мкг/см3, по формуле
, (1)
где A453 - оптическая плотность исходного раствора при максимальной длине волны 453 нм;
2592 - значение коэффициента экстинкции E для раствора в н-гексане. Оно может значительно отличаться для других растворителей [8].
Соотношение A455/A340 должно быть больше 15, а соотношение A455/A483 должно находиться в диапазоне от 1,14 до 1,18 для чистого полного [8].
4.12.3 Стандартный раствор
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>
