Утвержден и введен в действие
Приказом Федерального агентства
по техническому регулированию
и метрологии
от 29 ноября 2012 г. N 1580-ст
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ПРОПОЛИС
МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЛАВОНОИДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ
Propolis. Method for determination of flavonoid compositions
ГОСТ Р 55312-2012
Группа С52
ОКС 65.140
Дата введения
1 января 2014 года
Предисловие
1 РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением "Научно-исследовательский институт пчеловодства" Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ НИИ пчеловодства Россельхозакадемии)
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 432 "Пчеловодство"
3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 29 ноября 2012 г. N 1580-ст
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Правила применения настоящего стандарта установлены в ГОСТ Р 1.0-2012 (раздел 8). Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе "Национальные стандарты", а официальный текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (gost.ru)
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на прополис и устанавливает метод определения флавоноидных соединений.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения
ГОСТ Р 12.1.019-2009 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
ГОСТ Р 51652-2000 Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья. Технические условия
ГОСТ Р 52001-2002 Пчеловодство. Термины и определения
ГОСТ Р 53228-2008 Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования.
ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования
ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание
ГОСТ 12.4.103-83 Система стандартов безопасности труда. Одежда специальная защитная, средства индивидуальной защиты ног и рук. Классификация
ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
ГОСТ 14919-83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 28886-90 Прополис. Технические условия
ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования
Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Термины и определения
В настоящем стандарте приведены термины по ГОСТ Р ИСО 5725-1, ГОСТ Р 52001.
4 Отбор и подготовка пробы
4.1 Отбор проб - по ГОСТ 28886 (подраздел 3.1).
4.2 Прополис в комках, брикетах измельчают. Анализируемую пробу прополиса тщательно перемешивают не менее 3 мин.
5 Сущность метода
Метод основан на спектрофотометрическом определении оптической плотности комплексов, образующихся при взаимодействии флавоноидов, входящих в состав продуктов пчеловодства, с хлоридом алюминия. В качестве стандарта служит рутин. Определение массовой доли суммы флавоноидов в продуктах пчеловодства в пересчете на рутин следует проводить в интервале длин волн 408 - 420 нм.
6 Требования безопасности проведения работ
6.1 При проведении измерений необходимо соблюдать требования электробезопасности при работе с приборами по ГОСТ Р 12.1.019.
6.2 Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.
6.3 При выполнении анализов необходимо выполнять требования безопасности при работе с реактивами по ГОСТ 12.4.103.
6.4 К проведению анализов допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже среднего технического образования, владеющие навыками проведения анализов и изучившие инструкции по эксплуатации используемой аппаратуры.
7 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы
7.1 Весы лабораторные с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания +/- 0,001 г по ГОСТ Р 53228.
7.2 Спектрофотометр, позволяющий проводить измерение оптической плотности при длине волны 390 - 420 нм.
7.3 Кюветы кварцевые с толщиной слоя раствора, поглощающего свет, равной 1 см.
7.4 Горелка газовая, электроплитка или колбонагреватель по ГОСТ 14919.
7.5 Колбы мерные наливные 2-25-1, 2-50-1, 2-100-1 по ГОСТ 1770.
7.6 Колбы конические Кн-1-100-14/23, Кн-1-250-14/23 по ГОСТ 25336.
7.7 Воронки В-36-60 или В-36-80 по ГОСТ 25336.
7.8 Механические дозаторы 1-канальные с варьируемыми объемами дозирования 100 - 1000 мкл, 1 - 5 см3 1-го класса точности.
7.9 Пипетки 2-1-1-1, 2-2-25, 2-2-5 по ГОСТ 29227.
7.10 Баня водяная лабораторная с электрическим или огневым подогревом.
7.11 Цилиндры мерные 1-100 по ГОСТ 1770.
7.12 Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.
7.13 Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ Р 51652, с массовой долей 96%.
7.14 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
7.15 Алюминий хлористый 6-водный [AlCl3·6H2O], с содержанием основного вещества не ниже 99%, Fluka, каталожный номер 7784-13-6.
7.16 Рутин, ГСО.
Допускается применение других средств измерения с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками не хуже, а также реактивов по качеству не ниже вышеуказанных.
8 Подготовка к выполнению измерений
8.1 Приготовление 5% раствора хлористого алюминия в 60%-ном этаноле
В коническую колбу вместимостью 250 см3 по ГОСТ 25336 взвешивают (5,000 +/- 0,001) г хлористого алюминия, растворяют в (50,0 +/- 0,5) г 60%-ного этанола, массу раствора доводят до (100,00 +/- 0,01) г 60%-ным этанолом и тщательно перемешивают. Срок хранения раствора - не более одного года.
8.2 Приготовление раствора ГСО рутина
(0,050 +/- 0,001) г ГСО рутина взвешивают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3 по ГОСТ 1770, добавляют 40 см3 60%-ного этанола, нагревают до 50 °C - 60 °C и выдерживают до полного растворения рутина. Затем охлаждают до комнатной температуры, доводят до метки 60%-ным этанолом и тщательно перемешивают.
8.3 Построение калибровочного графика
В две мерные колбы вместимостью 25 см3 по ГОСТ 1770 дозатором вносят по 0,2 (0,4; 0,6; 0,8, 1,0 и 1,2) см3 раствора рутина по 6.7.2.2 концентрацией 1 мг/см3; в одну колбу добавляют 4 см3 раствора хлористого алюминия по 6.7.2.1 (рабочий раствор), доводят до метки обе колбы 60%-ным этанолом и тщательно перемешивают. Через 30 мин измеряют оптическую плотность рабочих растворов относительно растворов сравнения (рутин без хлористого алюминия) при длине волны максимума поглощения в интервале 390 - 420 нм в кюветах с толщиной оптического слоя 1 см.
При построении калибровочного графика на оси абсцисс откладывают количество рутина в миллиграммах, содержащегося в 25 см3 рабочего раствора, а по оси ординат - максимальное значение оптической плотности в указанном диапазоне.
Калибровочный график должен быть линейным и проходить через начало координат.
9 Проведение измерений
9.1 Подготовка пробы
(1,000 +/- 0,001) г прополиса взвешивают в конической колбе вместимостью 10 см3 по ГОСТ 25336, добавляют (30,0 +/- 0,5) см3 60%-ного этанола, колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин, периодически встряхивая для смывания частиц прополиса со стенок. Надосадочную жидкость фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 см3 так, чтобы частицы прополиса не попали на фильтр.
Экстракцию флавоноидов повторяют еще дважды в описанных выше условиях, прибавляя к остатку по (30,0 +/- 0,1) см3 60%-ного этанола. Фильтраты объединяют, охлаждают до (20 +/- 3) °C и доводят до метки (100,00 +/- 0,01) см3 60%-ным этанолом.
9.2 Проведение испытания
В две мерные колбы вместимостью 25 см3 дозатором вносят по (5,00 +/- 0,01) см3 экстракта по 6.7.2.4. В одну колбу (анализируемый раствор) добавляют (4,0
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>
