Утвержден и введен в действие
Приказом Федерального
агентства по техническому
регулированию и метрологии
от 27 июня 2013 г. N 209-ст
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ЛОШАДИ
МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ГЕЛЬМИНТОЗОВ
Horses. Methods for laboratory helminthosis diagnostics
ГОСТ Р 55457-2013
ОКС 11.220
Дата введения
1 июля 2014 года
Предисловие
1. Разработан Государственным научным учреждением "Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им. К.И. Скрябина" Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ "ВИГИС" Россельхозакадемии).
2. Внесен Техническим комитетом по стандартизации ТК 454 "Охрана жизни и здоровья животных и ветеринарно-санитарная безопасность продуктов животного происхождения и кормов".
3. Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 27 июня 2013 г. N 209-ст.
4. Введен впервые.
Правила применения настоящего стандарта установлены в ГОСТ Р 1.0-2012 (раздел 8). Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе "Национальные стандарты", а официальный текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (gost.ru).
1. Область применения
Настоящий стандарт распространяется на лошадей и устанавливает методы лабораторной диагностики гельминтозов.
2. Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ Р 12.1.019-2009 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
ГОСТ Р 54001-2010 Удобрения органические. Методы гельминтологического анализа
ГОСТ Р 54627-2011 Животные сельскохозяйственные жвачные. Методы лабораторной диагностики гельминтозов
ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
ГОСТ 12.1.018-93 Система стандартов безопасности труда. Пожаровзрывобезопасность статического электричества. Общие требования
ГОСТ 12.4.011-89 Система стандартов безопасности труда. Средства защиты работающих. Общие требования и классификация
ГОСТ 61-75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия
ГОСТ 244-76 Натрия тиосульфат кристаллический. Технические условия
ГОСТ 4523-77 Реактивы. Магний сернокислый 7-водный. Технические условия
ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ 22280-76 Реактивы. Натрий лимоннокислый 5,5-водный. Технические условия.
Примечание. При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии по стандартизации в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана недатированная ссылка, то рекомендуется использовать действующую версию этого стандарта с учетом всех внесенных в данную версию изменений. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, то рекомендуется использовать версию этого стандарта с указанным выше годом утверждения (принятия). Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение рекомендуется применять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, рекомендуется применять в части, не затрагивающей эту ссылку.
3. Термины и определения
В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ Р 54627.
4. Общие положения
Общие положения методов лабораторной диагностики гельминтозов лошадей - по ГОСТ Р 54627 (раздел 4).
5. Требования безопасности
5.1. Сотрудники, выполняющие работу по отбору, доставке и анализу проб, должны иметь рабочую спецодежду: халаты, фартуки, перчатки, резиновую обувь по ГОСТ 12.4.011. Рабочие халаты подлежат обмену на чистые по истечении каждой рабочей недели. Спецодежду и обувь хранят в шкафах.
Сотрудники должны быть обеспечены средствами и условиями для личной гигиены и обязаны соблюдать санитарно-гигиенические требования.
5.2. Требования безопасности при работе с химическими реактивами - по ГОСТ 12.1.007, с электрооборудованием - по ГОСТ Р 12.1.019.
Требования пожарной безопасности - по ГОСТ 12.1.018.
5.3. Помещение, в котором проводят исследования, должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией. Работы необходимо проводить в вытяжном шкафу с применением резиновых перчаток.
6. Средства измерений, вспомогательное оборудование,
посуда, материалы и реактивы
6.1. Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, материалы и реактивы - по ГОСТ Р 54627 (раздел 6) со следующим дополнением.
Устройство для сбора личинок и мелких нематод из фекалий (звездочка).
Кислота уксусная по ГОСТ 61, раствор 3%-ный.
Натрий лимоннокислый по ГОСТ 22280.
Гематоксилин.
Краска Романовского-Гимза.
Сыворотка крови лошади.
6.2. Допускается применение других средств измерений, вспомогательного оборудования, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающим необходимую точность измерения, а также реактивов и материалов по качеству не хуже вышеуказанных.
7. Подготовка к исследованиям
Подготовку к исследованиям проводят по ГОСТ Р 54627 со следующими дополнениями.
7.1. Отбор и подготовка проб фекалий
Точечные пробы отбирают из фекалий лошадей, патологического материала, соскобов объектов внешней среды, промежуточных хозяев гельминтов.
Точечные пробы фекалий от живых лошадей берут из прямой кишки (10 г) или только что выделившегося испражнения.
В сопроводительном документе, направляемом с пробой в лабораторию, также указывают конюшню и число животных в конюшне.
При индивидуальном обследовании жеребцов-производителей, конематок и особо ценных спортивных лошадей номера на упаковке и в описи должны строго соответствовать.
7.2. Отбор и подготовка проб почвы, приготовление растворов - по ГОСТ Р 54627.
7.3. Приготовление комбинированного раствора сернокислого магния и тиосульфата натрия плотностью 1,3 г/см3
Раствор 1. 1000 г магния сернокислого 7-водного по ГОСТ 4523 растворяют в 1 дм3 горячей дистиллированной воды по ГОСТ 6709. Через 24 ч раствор фильтруют в чистую стеклянную посуду.
Срок хранения раствора 1 в стеклянной колбе - не более 30 дней.
Раствор 2. 2000 г натрия тиосульфата по ГОСТ 244 растворяют в 1 дм3 горячей дистиллированной воды по ГОСТ 6709. Через 24 ч раствор фильтруют в чистую стеклянную посуду.
Срок хранения раствора 2 в стеклянной колбе - не более 30 дней.
Раствор 3. Три части раствора 1 смешивают с тремя частями раствора 2, затем к шести частям получившейся смеси растворов добавляют одну часть дистиллированной воды. Ареометром проверяют плотность рабочего раствора, которая должна быть 1,3 г/см3.
Срок хранения раствора 3 в стеклянной колбе - не более 30 дней.
8. Флотационные методы определения
наличия яиц и личинок гельминтов
8.1. Для определения наличия яиц и личинок гельминтов лошадей применяют флотационные методы по ГОСТ Р 54627 (подразделы 8.1 - 8.4), а также комбинированный флотационный метод Бреза для диагностики нематодозов и цестодозов.
8.2. Комбинированный флотационный метод Бреза для диагностики нематодозов и цестодозов
Анализируемую пробу массой 3 г в ступке заливают 10 - 15 см3 комбинированного раствора сернокислого магния и тиосульфата натрия по 7.2.1, растирают пестиком до гомогенного состояния, доливают комбинированным раствором до 45 - 50 см3, размешивают стеклянной палочкой и процеживают через металлическое сито с ячейкой диаметром 0,3 - 0,5 мм в чистый стакан и отстаивают в течение 10 - 15 мин.
Затем снимают капли поверхностной взвеси из разных мест легким прикосновением металлической петли диаметром 0,8 см, переносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом.
9. Седиментационные методы диагностики трематодозов
Для диагностики фасциолеза и других гельминтозов лошадей применяют седиментационный метод последовательного промывания по ГОСТ Р 54627 (подразделы 9.1 - 9.2).
10. Комбинированные (седиментационно-флотационные) методы
Для определения гельминтозов лошадей применяют комбинированные (седиментационно-флотационные) методы Дарлинга, Щербовича и Вишняускаса по ГОСТ Р 54627 (раздел 10), а также метод Бреза со следующим уточнением.
Приготовленную в ступке водную суспензию из 3 г фекалий лошадей процеживают через сито в чистую стеклянную центрифужную пробирку вместимостью 10 - 15 см3 и центрифугируют с частотой вращения 2000 - 3000 об/мин в течение 2 - 3 мин. После этого надосадочную жидкость осторожно сливают, а к осадку
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>
