Введен в действие
Приказом Федерального
агентства по техническому
регулированию и метрологии
от 17 октября 2013 г. N 1170-ст
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ АФЛАТОКСИНА B1 В ПРОДУКТАХ НА ЗЕРНОВОЙ ОСНОВЕ
ДЛЯ ПИТАНИЯ ГРУДНЫХ ДЕТЕЙ И ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА
МЕТОД ВЭЖХ С ПРИМЕНЕНИЕМ ИММУНОАФФИННОЙ КОЛОНОЧНОЙ ОЧИСТКИ
ЭКСТРАКТА И ФЛУОРИМЕТРИЧЕСКИМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ
Foodstuffs. Determination of aflatoxin B1 in cereal based
foods for infants and young children. HPLC method with
immunoaffinity column cleanup and fluorescence detection
(EN 15851:2010, IDT)
ГОСТ EN 15851-2013
МКС 67.050
67.060
Дата введения
1 июля 2014 года
Предисловие
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"
Сведения о стандарте
1 ПОДГОТОВЛЕН Открытым акционерным обществом "Всероссийский научно-исследовательский институт сертификации" (ОАО "ВНИИС") при участии специалистов Государственного научного учреждения Всероссийского научно-исследовательского института консервной и овощесушильной промышленности Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИКОП Россельхозакадемии) на основе собственного аутентичного перевода на русский язык европейского регионального стандарта, указанного в пункте 4
2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (ТК 335)
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 28 августа 2013 г. N 58-П)
За принятие проголосовали:
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Армения AM Минэкономики Республики Армения
Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь
Киргизия KG Кыргызстандарт
Молдова MD Молдова-Стандарт
Россия RU Росстандарт
Узбекистан UZ Узстандарт
4 Настоящий стандарт идентичен европейскому региональному стандарту EN 15851:2010 "Foodstuffs. Determination of aflatoxin B1 in cereal based foods for infants and young children. HPLC method with immunoaffinity column cleanup and fluorescence detection" (Продукты пищевые. Определение афлатоксина B1 в продуктах на зерновой основе для питания грудных детей и детей раннего возраста. Метод ВЭЖХ с применением иммуноаффинной колоночной очистки экстракта и флуориметрическим детектированием).
Перевод с немецкого языка (de).
Официальный экземпляр европейского регионального стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, имеется в Федеральном агентстве по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации.
Степень соответствия - идентичная (IDT)
5 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 17 октября 2013 г. N 1170-ст межгосударственный стандарт ГОСТ EN 15851-2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2014 г.
6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает метод определения афлатоксина B1 в продуктах на зерновой основе для питания грудных детей и детей раннего возраста с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с применением очистки экстракта на колонке с иммуноаффинным сорбентом и флуориметрическим детектированием. Метод прошел валидацию путем межлабораторных испытаний проб, загрязненных афлатоксином B1 естественным и искусственным образом в диапазоне содержания от 0,07 до 0,18 мкг/кг. Подробная информация о валидации метода приведена в разделе 9 и в приложении B.
2 Нормативные ссылки
Приведенные ниже ссылочные нормативные документы являются обязательными для применения настоящего стандарта. Датированные ссылки предполагают возможность использования только указанного издания документа. В случае недатированных ссылок используют последнее издание документа, включая все дополнения.
EN ISO 3696:1995 Water for analytical laboratory use - Specification and test methods (ISO 3696:1987) (Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний)
3 Сущность метода
Анализируемую пробу экстрагируют смесью метанола и воды. Экстракт фильтруют, разбавляют фосфатно-хлоридным буферным раствором и пропускают через колонку с иммуноаффинным сорбентом, содержащим антитела, специфичные к афлатоксину B1, при этом происходит очистка экстракта и концентрирование афлатоксина B1. Афлатоксин B1 элюируют с колонки метанолом и определяют с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ с применением послеколоночной дериватизации методом бромирования и детектированием по флуоресценции.
Послеколоночную дериватизацию осуществляют с использованием брома, полученного электрохимическим путем или с помощью бромида-пербромида пиридиния.
4 Реактивы
4.1 Общие положения
Для проведения анализа при отсутствии особо оговоренных условий используют только реактивы гарантированной аналитической чистоты и воду не ниже первой степени чистоты по EN ISO 3696:1995. Используемые растворители по степени чистоты должны быть пригодны для применения в анализе с помощью ВЭЖХ. Допускается использование готовых растворов, доступных для приобретения, при условии, что их характеристики не отличаются от приведенных ниже.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Утилизацию отработанных растворителей проводят в соответствии с требованиями законодательства по охране окружающей среды. Способы обезвреживания отработанных реактивов приведены в материалах Международного агентства по исследованию рака (IARC) [1].
4.2 Гелий газообразный очищенный сжатый.
4.3 Азот.
4.4 Натрий фосфорнокислый двухзамещенный безводный (Na2HPO4) или гидратированный (Na2HPO4·12H2O).
4.5 Калий бромистый.
4.6 Калий хлористый.
4.7 Калий фосфорнокислый однозамещенный.
4.8 Натрий хлористый.
4.9 Натрия гидроксид.
4.10 Кислота соляная, водный раствор массовой долей w (HCl) = 37%.
4.11 Кислота соляная, раствор молярной концентрации c (HCl) = 0,1 моль/дм3
Раствор готовят разбавлением 8,28 см3 раствора соляной кислоты по 4.10 водой до 1 дм3.
4.12 Натрия гидроксид, раствор молярной концентрации c (NaOH) = 0,1 моль/дм3
Растворяют 4 г гидроксида натрия по 4.9 в 1 дм3 воды.
4.13 Раствор фосфатно-хлоридный буферный молярной концентрации натрия хлористого c (NaCl) = 120 ммоль/дм3, хлористого калия c (KCl) = 2,7 ммоль/дм3, суммы натрия фосфорнокислого и калия фосфорнокислого c (Na2HPO4 + KH2PO4) = 10 ммоль/дм3, pH = 7,4
Растворяют 8,0 г натрия хлористого по 4.8, 1,2 г безводного двухзамещенного фосфорнокислого натрия [или 2,9 г гидратированного двухзамещенного фосфорнокислого натрия (Na2HPO4·12H2O)] по 4.4, 0,2 г однозамещенного фосфорнокислого калия по 4.7 и 0,2 г хлористого калия по 4.6 в 900 см3 воды.
Значение pH приготовленного раствора доводят до 7,4 ед. pH путем добавления раствора соляной кислоты по 4.11, либо раствора гидроксида натрия по 4.12, после чего объем раствора доводят водой до 1 дм3. В качестве альтернативы допускается использовать доступный для приобретения таблетированный препарат или готовый раствор с аналогичными характеристиками.
4.14 Пиридиния бромид-пербромид (CAS 39416-48-3).
4.15 Ацетонитрил.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Ацетонитрил является токсичным веществом, поэтому все операции по приготовлению растворов, содержащих ацетонитрил, следует проводить в вытяжном шкафу с использованием взрывобезопасного перемешивающего устройства. Фильтрование растворов, содержащих ацетонитрил, следует проводить также в вытяжном шкафу.
4.16 Метанол для ВЭЖХ.
4.17 Метанол технический.
4.18 Толуол.
4.19 Экстрагент
Смешивают 8 объемных частей метанола по 4.17 с двумя объемными частями воды.
4.20 Кислота азотная, раствор молярной концентрации c (HNO3) = 4 моль/дм3.
4.21 Подвижная фаза A для использования при послеколоночной дериватизации бромидом-пербромидом пиридиния
Смешивают шесть объемных частей воды с двумя объемными частями ацетонитрила по 4.15 и тремя объемными частями метанола по 4.16. Перед использованием подвижную фазу дегазируют, например, с помощью гелия по 4.2.
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>
