Утвержден и введен в действие
Приказом Федерального
агентства по техническому
регулированию и метрологии
от 9 июля 2014 г. N 705-ст
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
КОРМА И КОРМОВЫЕ ДОБАВКИ
МЕТОДЫ ИДЕНТИФИКАЦИИ И КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГМО
РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
Feed and feed additives. Methods of identification
and determination GMO of plant origin
ГОСТ Р 56058-2014
ОКС 65 120
Дата введения
1 июля 2015 года
Предисловие
1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным учреждением "Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов" (ФГБУ "ВГНКИ")
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 454 "Охрана жизни и здоровья животных и ветеринарно-санитарная безопасность продуктов животного происхождения и кормов"
3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 9 июля 2014 г. N 705-ст
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Правила применения настоящего стандарта установлены в ГОСТ Р 1.0-2012 (раздел 8). Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе "Национальные стандарты", а официальный текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске информационного указателя "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (gost.ru)
1. Область применения
Настоящий стандарт распространяется на корма, кормовые добавки и сырье для их производства и устанавливает метод идентификации и количественного определения содержания генетически-модифицированной сои (далее - ГМ сои) и генетически-модифицированной кукурузы (далее - ГМ кукурузы) методом полимеразной цепной реакции (далее - ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени (Real Time PCR).
2. Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ 31719-2012 Продукты пищевые и корма. Экспресс-метод определения сырьевого состава (молекулярный)
ГОСТ Р ИСО 6497-2011 Корма для животных. Отбор проб
ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025-2009 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий
ГОСТ Р 51848-2001 Продукция комбикормовая. Термины и определения
ГОСТ Р 52173-2003 Сырье и продукты пищевые. Метод идентификации генетически-модифицированных источников (ГМИ) растительного происхождения
ГОСТ Р 53244-2008 (ИСО 21570:2005) Продукты пищевые. Методы анализа для обнаружения генетически-модифицированных организмов и полученных из них продуктов. Методы, основанные на количественном определении нуклеиновых кислот
ГОСТ Р 55576-2013 Корма и кормовые добавки. Метод качественного определения регуляторных последовательностей в геноме сои и кукурузы
Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана недатированная ссылка, то рекомендуется использовать действующую версию этого стандарта с учетом всех внесенных в данную версию изменений. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, то рекомендуется использовать версию этого стандарта с указанным выше годом утверждения (принятия). Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение рекомендуется применять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, рекомендуется применять в части, не затрагивающей эту ссылку.
3. Термины и определения
В настоящем стандарте применены термины, определения и сокращения по ГОСТ Р ИСО 6497, ГОСТ Р 51848, ГОСТ Р 55576 и ГОСТ 31719.
4. Условия выполнения испытаний и требования безопасности
Условия выполнения испытаний и требования безопасности - по ГОСТ Р 55576 (раздел 4, приложение А).
5. Оборудование, материалы и реагенты
5.1 Требования к оборудованию - по ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025.
5.2 При проведении испытаний применяют оборудование и материалы по ГОСТ 31719, а также следующие:
- бокс ламинарный II класса биологической безопасности;
- отсасыватель вакуумный медицинский с колбой-ловушкой для удаления надосадочной жидкости;
- микропробирки одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся или плотно закрывающиеся вместимостью 1,5 см3;
- микропробирки одноразовые полипропиленовые вместимостью 0,2 см3;
- ПЦР-бокс;
- прибор для проведения ПЦР <*>;
- халаты медицинские.
--------------------------------
<*> Прибор для проведения ПЦР "Rotor-Gene" 2000/3000/6000 ("Corbett Research", Австралия). Данная информация является рекомендуемой и приведена для удобства пользователей настоящего стандарта.
Допускается использование другого оборудования и материалов с техническими характеристиками не хуже указанных выше.
5.3 При проведении испытаний применяют реагенты для экстракции ДНК по ГОСТ Р 55576, а также следующие реагенты, праймеры и зонды для проведения ПЦР и амплификации.
5.3.1 Реагенты:
- вода деионизованная;
- ПЦР-буфер;
- раствор дезоксинуклеотидтрифосфатов (дНТФ) 10x (10-кратная смесь четырех компонентов с концентрацией каждого компонента 1,76 x 10-3 моль/дм3);
- Taq-полимераза термостабильная;
- образцы стандартные состава ГМ сои и ГМ кукурузы, содержащие от 0,1% до 5,0% линий ГМ сои и ГМ кукурузы <*>.
--------------------------------
<*> Стандартные образцы состава ГМ сои и ГМ кукурузы "Сигма Алдрич", CCM от JRC, IRMM. Данная информация является рекомендуемой и приведена для удобства пользователей настоящего стандарта.
Допускается использование других реактивов с техническими характеристиками не хуже указанных выше.
5.3.2 Праймеры (смесь олигонуклеотидов) и зонды (меченные флуоресцентными красителями FAM и R6G):
5.3.2.1 Для определения ГМ сои линии 40-3-2:
а) специфичные целевой последовательности:
1) праймер 1: 5'-GCC ATG TTG TTA ATT TGT GCC AT 3';
2) праймер 2: 5'-GAA GTT CAT TTC ATT TGG AGA GGA CC 3';
3) зонд: 5'-FAM-CTT GAA AGA TCT GCT AGA GTC AGC TTG TCA GCG-BHQ1-3';
б) специфичные гену лектина (lec1):
1) праймер 1: 5'-TCC ACC CCC ATC CAC ATT T-3';
2) праймер 2: 5'-GGC ATA GAA GGT GAA GTT GAA GGA-3';
3) зонд: 5'-R6G-AAC CGG TAG CGT TGC CAG CTT CG-BHQ1-3';
5.3.2.2 Для определения ГМ сои линии A2704-12:
а) специфичные целевой последовательности:
1) праймер 1: 5'-GCA AAA AAG CGG TTA GCT CCT-3';
2) праймер 2: 5'-ATT CAG GCT GCG CAA CTG TT-3';
3) зонд: 5'-FAM-CGG TCC TCC GAT CGC CCT TCC-BHQ1-3';
б) специфичные гену лектина (lec2):
1) праймер 1: 5'-CAC CTT TCT CGC ACC AAT TGA CA-3';
2) праймер 2: 5'-TCA AAC TCA ACA GCG ACG AC-3';
3) зонд: 5-R6G-CCA CAA ACA CAT GCA GGT TAT CTT GG-BHQ1-3';
5.3.2.3 Для определения ГМ сои линии A5547-127:
а) специфичные целевой последовательности:
1) праймер 1: 5'-GCT ATT TGG TGG CAT TTT TCC A 3';
2) праймер 2: 5'-CAC TGC GGC CAA CTT ACT TCT 3';
3) зонд: 5'-FAM-CC GCA ATG TCA TAC CGT CAT CGT TGT-BHQ1-3';
б) специфичные гену лектина (lec3):
1) праймер 1: 5'-CCT TCT CGC ACC AAT TGA CA-3';
2) праймер 2: 5'-TCA AAC TCA ACA GCG ACG AC-3';
3) зонд: 5'-R6G-CC ACA AAC ACA TGC AGG TTA TCT TGG-BHQ1-3';
5.3.2.4 Для определения ГМ кукурузы линии MON 810:
а) специфичные целевой последовательности:
1) праймер 1: 5'-TCG AAG GAC GAA GGA CTC TAA CGT-3';
2) праймер 2: 5'-GCC ACC TTC CTT TTC CAC TAT CTT-3';
3) зонд: 5'-FAM-AAC ATC CTT TGC CAT TGC CCA GC-BHQ1-3';
б) специфичные гену зеина (hmg):
1) праймер 1: 5'-TTG GAC TAG AAA TCT CGT GCT GA-3';
2) праймер 2: 5'-GCT ACA TAG GGA GCC TTG TCC T-3';
3) зонд: 5'-R6G-CAA TCC ACA CAA ACG CAC GCG TA-BHQ1-3';
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>
