Введен в действие
Приказом Федерального
агентства по техническому
регулированию и метрологии
от 24 сентября 2014 г. N 1212-ст
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ,
ПРЕДСТАВЛЯЮЩЕЙ ОПАСНОСТЬ ДЛЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
ПОЧВЕННЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ. ИСПЫТАНИЕ НА ТРАНСФОРМАЦИЮ АЗОТА
Testing methods for chemicals of environmental hazard.
Soil microorganisms. Nitrogen transformation test
(OECD, Test N 216:2000, IDT)
ГОСТ 32631-2014
Группа Т58
МКС 13.020.01
Дата введения
1 июня 2015 года
Предисловие
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила, рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены".
Сведения о стандарте
1. Подготовлен Федеральным государственным унитарным предприятием "Всероссийский научно-исследовательский центр стандартизации, информации и сертификации сырья, материалов и веществ" (ФГУП "ВНИЦСМВ") и Техническим комитетом по стандартизации ТК 339 "Безопасность сырья, материалов и веществ" Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии.
2. Внесен Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт).
3. Принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 30 мая 2014 г. N 67-П).
За принятие проголосовали:
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Азербайджан AZ Азстандарт
Армения AM Минэкономики Республики Армения
Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь
Казахстан KZ Госстандарт Республики Казахстан
Киргизия KG Кыргызстандарт
Молдова MD Молдова-Стандарт
Россия RU Росстандарт
Таджикистан TJ Таджикстандарт
Туркменистан TM Туркменстандартлары
Узбекистан UZ Узстандарт
Украина UA Минэкономразвития Украины
4. Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 24 сентября 2014 г. N 1212-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 32631-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июня 2015 г.
5. Настоящий стандарт идентичен международному документу OECD Test No. 216:2000 Soil Microorganisms: Nitrogen Transformation Test (Почвенные микроорганизмы: Испытание на трансформацию азота).
Перевод с английского языка (en).
Степень соответствия - идентичная (IDT).
6. Введен впервые.
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.
1. Область применения
Настоящий стандарт устанавливает метод определения воздействия исследуемого вещества на процессы микробиологической трансформации азота в почве.
2. Термины и определения
В настоящем стандарте применены термины с соответствующими определениями:
2.1. Трансформация азота: окончательная минерализация азотсодержащих органических соединений почвенными микроорганизмами посредством процессов аммонификации и нитрификации до соответствующих неорганических нитратов.
2.2. ECx (эффективная концентрация): концентрация исследуемого вещества в почве, которая приводит к X%-му ингибированию трансформации азота в нитраты в течение установленного периода воздействия.
2.3. EC50 (средняя эффективная концентрация): концентрация исследуемого вещества в почве, которая приводит к 50%-му ингибированию трансформации азота в нитраты в течение установленного периода воздействия.
3. Общие сведения
Изучение воздействия химического вещества на деятельность почвенных микроорганизмов может потребоваться, когда необходимы сведения о потенциальных побочных эффектах средств защиты растений на почвенную микрофлору или когда на почвенные микроорганизмы могут оказывать воздействие химические вещества, не являющиеся средствами защиты растений. С целью определения такого воздействия проводится исследование трансформации азота в почве. При тестировании агрохимикатов (например, средств защиты растений, удобрений, лесных химикатов) одновременно проводят исследования трансформации азота и углерода. При тестировании прочих химических веществ достаточно проводить только исследование трансформации азота. Однако, если значение EC50 в исследовании трансформации азота для таких химических веществ попадает в диапазон, определенный для существующих ингибиторов нитрификации (например, нитрапирина), то для получения дополнительной информации может проводиться также исследование трансформации углерода.
Почва состоит из живых и неживых компонентов, которые существуют в виде комплексных и гетерогенных смесей. Микроорганизмы играют важную роль в разрушении и трансформации органического вещества в плодородных почвах, поскольку на различные аспекты плодородия почв оказывают влияние различные виды микроорганизмов. Любое долгосрочное вмешательство в такие биохимические процессы потенциально может препятствовать круговороту питательных веществ, что в свою очередь может вызвать изменения плодородия почв. Трансформация углерода и азота происходит во всех плодородных почвах. Несмотря на то, что микробные сообщества, отвечающие за протекание данных процессов, отличаются в зависимости от почвы, пути трансформации по сути остаются одинаковыми.
Метод, представленный в настоящем стандарте, предназначен для обнаружения долгосрочного побочного воздействия вещества на процесс трансформации азота в аэробной поверхности почвы. Метод также позволяет оценить воздействие вещества на трансформацию углерода почвенной микрофлорой. Образование нитратов происходит непосредственно после разрыва связей углерод - азот. Таким образом, если в тестируемых и контрольных почвах обнаруживают равные скорости образования нитратов, то весьма вероятно, что основные пути деградации углерода не затрагиваются и остаются функциональными. Субстрат, выбранный для проведения тестирования (порошкообразная люцерновая мука), имеет благоприятное соотношение содержания углерода к азоту (обычно между 12/1 и 16/1). Вследствие этого углеродное голодание в ходе тестирования снижается, и если в результате воздействия химического вещества микробные сообщества повреждаются, то они смогут восстановиться в течение 100 дней.
Настоящий метод, главным образом, предназначен для веществ, для которых известно ожидаемое количество поступления в почву. Это касается, например, средств защиты растений, для которых известны нормы внесения в почву.
Для агрохимикатов достаточно проводить тестирование двух доз, соответствующих ожидаемой или прогнозируемой норме внесения в почву. Тестирование агрохимикатов можно проводить в виде активных ингредиентов (АИ) или в виде готовых смесей.
Тестирование также может проводиться для прочих химических веществ. При изменении количества исследуемого вещества, вносимого в почву, а также способа оценки данных тест может также использоваться для химических веществ, для которых ожидаемое количество поступления в почву неизвестно. Для таких химических веществ определяется воздействие нескольких концентраций на трансформацию азота. Данные тестирования используются для построения кривой доза - отклик (тестируемая концентрация - ингибирование трансформации азота) и расчета значения ECx, где x определяется как процент воздействия.
4. Принцип теста
Просеянную почву, в которую вносится порошкообразный субстрат, обрабатывают исследуемым веществом или оставляют без обработки (контрольная проба). При тестировании агрохимикатов рекомендуется использовать как минимум две тестируемые концентрации, которые должны быть выбраны в зависимости от наиболее высокой ожидаемой дозы внесения в почву. По прошествии 0-го, 7-го, 14-го и 28-го дней инкубации тестируемые и контрольные пробы почвы экстрагируют растворителем и определяют количество нитратов в экстрактах. Скорость образования нитратов в тестируемой пробе сравнивают со скоростью в контрольной пробе и рассчитывают процент отклонения от контрольного значения. Тест выполняется как минимум в течение 28 дней. Если на 28-й день отклонение между тестируемой и контрольной пробой равно или больше 25%, то тест продолжают в течение не более 100 дней. При тестировании прочих химических веществ исследуемое вещество в различных концентрациях добавляют в пробы почвы и по прошествии 28 дней инкубации измеряют количество нитратов, образовавшихся в тестируемой и контрольной пробах. Проводят статистическую обработку результатов тестирования нескольких концентраций с помощью регрессионной модели и вычисляют значения ECx (например EC50, EC25 и (или) EC10).
5. Достоверность теста
Оценка результатов тестирования агрохимикатов основана на относительно небольших отклонениях (среднее значение составляет +/- 25%) в концентрации нитратов в тестируемой и контрольной пробах почвы, поэтому большие различия в концентрации нитратов в параллельных контрольных пробах могут привести к получению ложных результатов. Таким образом, различия в концентрации нитратов в параллельных контрольных пробах должно быть менее +/- 15%.
6. Описание теста
6.1. Оборудование
6.1.1. При тестировании используются контейнеры, изготовленные из химически инертного материала. Контейнеры должны быть подходящего размера для проведения процедуры инкубации почвы. Инкубация может проводиться либо для одной большой партии почвы, либо для серии индивидуальных проб почвы (п. 24). При тестировании следует уделять внимание тому, чтобы минимизировать потери воды и обеспечить газообмен между почвой и атмосферой (например, контейнеры могут быть покрыты перфорированной полиэтиленовой пленкой). При тестировании летучих веществ необходимо использовать герметичные и газонепроницаемые контейнеры. Контейнеры должны быть такого размера, чтобы проба почвы занимала примерно одну четвертую их объема.
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>