Введен в действие
Приказом Федерального агентства
по техническому регулированию
и метрологии
от 20 ноября 2014 г. N 1695-ст
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ, ПРЕДСТАВЛЯЮЩЕЙ
ОПАСНОСТЬ ДЛЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ ДЛЯ ДОЖДЕВЫХ ЧЕРВЕЙ
Test methods for chemicals of environmental hazard.
Earthworm acute toxicity tests
(OECD, Test No 207:1984, IDT)
ГОСТ 33036-2014
Группа Т58
МКС 71.040.50
Дата введения
1 августа 2015 года
Предисловие
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены".
Сведения о стандарте
1. Подготовлен Федеральным государственным унитарным предприятием "Всероссийский научно-исследовательский центр стандартизации, информации и сертификации сырья, материалов и веществ" (ФГУП "ВНИЦСМВ") на основе собственного аутентичного перевода на русский язык руководящего документа, указанного в пункте 5.
2. Внесен Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт).
3. Принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (Протокол от 20 октября 2014 г. N 71-П).
За принятие проголосовали:
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Азербайджан AZ Азстандарт
Армения AM Минэкономики Республики Армения
Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь
Киргизия KG Кыргызстандарт
Молдова MD Молдова-Стандарт
Россия RU Росстандарт
Таджикистан TJ Таджикстандарт
4. Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 20 ноября 2014 г. N 1695-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33036-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 августа 2015 г.
5. Настоящий стандарт идентичен руководящему документу OECD, Test No 207:1984 Earthworm, Acute Toxicity Tests (Определение острой токсичности для дождевых червей).
Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного руководящего документа для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5-2001 (подраздел 3.6).
Перевод с английского языка (en).
Степень соответствия - идентичная (IDT).
6. Введен впервые.
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.
1. Область применения
Настоящий стандарт устанавливает метод определения острой токсичности химических веществ для дождевых червей.
2. Термины и определения
В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:
2.1. медианное значение летальной концентрации (LC50): Концентрация химического вещества в пищевом рационе, которая приводит к 50%-ной гибели тестируемых животных.
Примечание. Для контактного теста концентрацию вещества выражают в миллиграммах на квадратный сантиметр, для теста с искусственной почвой - в миллиграммах на килограмм (сухой массы почвы).
3. Принцип теста
Скриннинговый тест (контактный тест с фильтровальной бумагой) включает воздействие на червей тестируемого вещества, нанесенного на влажную фильтровальную бумагу, и позволяет идентифицировать вещества, потенциально токсичные для дождевых червей.
Тест с искусственной почвой включает экспозицию дождевых червей в специально приготовленной искусственной почве, содержащей тестируемое вещество в определенном диапазоне концентраций. Гибель дождевых червей оценивается на 7-й и 14-й день после применения тестируемого вещества.
В серии тестируемых концентраций вещества одна концентрация не должна вызывать гибели, а еще одна - должна приводить к гибели всех червей.
4. Информация о тестируемом веществе
Должна быть известна След информация о тестируемом веществе:
- растворимость в воде;
- давление паров;
- структурная формула;
- чистота;
- стабильность в воде, почве и на свету;
- коэффициент распределения н-октанол/вода;
- результаты теста на способность к биоразложению.
5. Вещество сравнения
Вещество сравнения в тесте для определения LC50 должно выбираться по собственному усмотрению и гарантировать, что лабораторные условия, в которых проводят опыты, соответствуют требованиям и не подвержены существенным временным изменениям. Оптимальным веществом сравнения, удовлетворяющим этим условиям, является хлорацетамид.
6. Достоверность теста
Тест считается достоверным, если гибель червей в контроле не превышает 10% к концу испытания.
7. Описание теста
7.1. Оборудование и материалы
Обычное лабораторное оборудование и специальные принадлежности:
- культура дождевых червей (см. 7.2);
- фильтровальная бумага среднего качества толщиной примерно 0,2 мм и плотностью от 80 до 85 г/м2;
- искусственный почвенный субстрат, приготовленный следующим образом:
10% сфагнового сухого и тонко растертого торфа (pH 5,5 - 6,0; без видимых растительных остатков);
20% каолиновой глины (с содержанием каолина около 30%);
70% промышленного песка (предпочтителен мелкий песок с преобладанием частиц размером от 50 до 200 микрон - более 50%).
pH в искусственном субстрате регулируют в пределах 6,0 +/- 0,5 карбонатом кальция [1]. Сухие составные части тщательно смешивают в строго установленных пропорциях, каждый раз взвешивая общую массу. Влажность смеси определяют при высушивании небольшого количества образца при температуре 105 °C. Деионизированную воду добавляют к полученной смеси до влажности примерно 35% сухой массы таким образом, чтобы при сжатии субстрата в руке не выделялась вода. Для некоторых видов торфа приемлемым будет и более высокое содержание влаги.
Сосуды, используемые в тесте, должны быть стеклянными вместимостью около 1 л и должны быть покрыты стеклянными крышками или перфорированной пленкой.
Освещение лабораторной комнаты или камеры должно контролироваться в пределах от 400 до 800 люкс, температура - (20 +/- 2) °C.
7.2. Экспериментальные животные
Рекомендуемый вид дождевых червей для теста - Eisenia foetida (Michaelsen). Этот вид не совсем типичен для традиционных типов почв и обычно обитает в почвах, богатых органическим веществом. Он чувствителен к химическим веществам, имеет короткий жизненный цикл - черви выводятся из коконов за 3 - 4 недели и достигают половой зрелости за 7 - 8 недель при температуре окружающей среды 20 °C. Вид очень плодовитый, взрослый червь производит от 2 до 5 коконов в неделю, из которых выводятся другие черви. Коконы можно приобрести или разводить, разделив популяцию на части (см. Приложение А).
Eisenia foetida существует в виде двух рас червей, морфологически сходных между собой [2]. Но одна раса - E. foetida foetida имеет типичные поперечные полоски на сегментах, а другая - E. foetida andrei не имеет таковых и более красного цвета. В тесте используют E. foetida foetida, однако возможно использование и другой расы.
Для опытов берут взрослых червей в возрасте от двух месяцев и живой массой от 300 до 600 мг.
7.3. Выполнение теста
7.3.1. Тест с фильтровальной бумагой
Рекомендуются плоскодонные стеклянные колбы с плоским дном или другие стеклянные сосуды высотой 8 см и диаметром 3 см с плоским дном, стенки которых покрывают фильтровальной бумагой, нарезанной таким образом, чтобы ее края частично перекрывали друг друга.
Тестируемое вещество известной концентрации растворяют в дистиллированной воде (если растворимость вещества не менее 1000 мг/л) или в наиболее
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>
