Введен в действие
Приказом Федерального
агентства по техническому
регулированию и метрологии
от 20 ноября 2014 г. N 1696-ст
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ, ПРЕДСТАВЛЯЮЩЕЙ
ОПАСНОСТЬ ДЛЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
ПОЧВЕННЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ: ТЕСТ НА ТРАНСФОРМАЦИЮ УГЛЕРОДА
Testing methods for chemicals of environmental hazard.
Soil microorganisms: carbon transformation test
(OECD, Test No 217:2000, IDT)
ГОСТ 33041-2014
Группа Т58
МКС 71.040.50
Дата введения
1 августа 2015 года
Предисловие
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены".
Сведения о стандарте
1. Подготовлен Федеральным государственным унитарным предприятием "Всероссийский научно-исследовательский центр стандартизации, информации и сертификации сырья, материалов и веществ" (ФГУП "ВНИЦСМВ") на основе собственного аутентичного перевода на русский язык руководящего документа, указанного в пункте 5.
2. Внесен Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт).
3. Принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 20 октября 2014 г. N 71-П).
За принятие проголосовали:
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Азербайджан AZ Азстандарт
Армения AM Минэкономики Республики Армения
Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь
Киргизия KG Кыргызстандарт
Молдова MD Молдова-Стандарт
Россия RU Росстандарт
Таджикистан TJ Таджикстандарт
4. Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 20 ноября 2014 г. N 1696-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33041-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 августа 2015 г.
5. Настоящий стандарт идентичен международному документу OECD Test No 217:2000 Soil Microorganisms: Carbon Transformation Test (Почвенные микроорганизмы: тест на трансформацию углерода).
Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного руководящего документа для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5-2001 (подраздел 3.6).
Перевод с английского языка (en).
Степень соответствия - идентичная (IDT).
6. Введен впервые.
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.
Введение
В настоящем стандарте описывается лабораторный метод тестирования, разработанный для изучения возможных долговременных последствий однократного применения средств защиты растений и других химических веществ на трансформацию углерода, связанную с деятельностью почвенных микроорганизмов. Тест основывается, главным образом, на рекомендациях Европейской и Средиземноморской Организации Защиты Растений (EPPO) [1]. Учтены также и руководства других организаций, включая Немецкую Службу Биологического Контроля (BBA) [2], Агентство по Охране Окружающей Среды США (US EPA) [3] и SETAC [4]. Совещание ОЭСР по стандартизации отбора образцов почв/осадков, состоявшееся в Белгирате, Италия, в 1995 г. [5], в частности, одобрило перечень и типы почв, пригодных для проведения настоящего теста. Рекомендации по отбору, обработке и хранению почвенных образцов в соответствии с ISO 10381-6 [6] и рекомендациях Белгиратского Совещания.
1. Область применения
В настоящем стандарте устанавливается метод определения воздействия тестируемого вещества на процессы микробиологической трансформации углерода в почве.
2. Термины и определения
В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:
2.1. Трансформация углерода (carbon transformation): микробная деградация органического вещества до конечного продукта диоксида углерода.
2.2. ECx (эффективная концентрация) (effective concentration): концентрация тестируемого вещества в почве, приводящая к ингибированию на x% трансформации углерода до CO2.
2.3. EC50 (медианная эффективная концентрация) (median effective concentration): концентрация тестируемого вещества в почве, вызывающая 50% ингибирование трансформации углерода до CO2.
3. Общие сведения
3.1. Изучение воздействия химического вещества на деятельность почвенных микроорганизмов может потребоваться, когда необходимы сведения о потенциальных побочных эффектах средств защиты растений на почвенную микрофлору или когда на почвенные микроорганизмы могут оказывать воздействие химические вещества, не являющиеся средствами защиты растений. С целью определения такого воздействия проводится исследование трансформации углерода в почве. При тестировании агрохимикатов (например, средств защиты растений, удобрений, лесных химикатов) одновременно проводят исследования трансформации углерода и азота. При тестировании прочих химических веществ достаточно проводить только исследование трансформации азота. Однако, если значение EC50 в исследовании трансформации азота для таких химических веществ попадает в диапазон, определенный для существующих ингибиторов нитрификации (например, нитрапирина), то для получения дополнительной информации может проводиться также исследование трансформации углерода.
3.2. Почва состоит из живых и неживых компонентов, которые существуют в виде комплексных и гетерогенных смесей. Микроорганизмы играют важную роль в разрушении и трансформации органического вещества в плодородных почвах, поскольку на различные аспекты плодородия почв оказывают влияние разные виды микроорганизмов. Любое долгосрочное вмешательство в такие биохимические процессы потенциально может препятствовать круговороту питательных веществ, что в свою очередь может вызвать изменения плодородия почв. Трансформация углерода и азота происходит во всех плодородных почвах. Несмотря на то, что микробные сообщества, отвечающие за протекание данных процессов, различаются в зависимости от почвы, пути трансформации по сути остаются одинаковыми.
3.3. Тест, описанный в настоящем стандарте, предназначен для оценки воздействия потенциальных токсикантов на процесс микробной трансформации углерода в почвах в аэробных условиях. Тест чувствителен к изменениям численности и активности микробных сообществ, ответственных за трансформацию углерода в почвах, как в результате химического стресса, так и в результате голодания. В тесте используют песчаную почву с низким содержанием органического вещества.
Тестируемое вещество вносят в эту почву и инкубируют в условиях, способствующих быстрому проявлению микробного метаболизма. В этих условиях источник доступного углерода в почве быстро расходуется. Углеродное голодание вызывает как гибель части микробных клеток, так стимулирует их переход в неактивное состояние или в форму спор. Если тест проводится в течение 28 сут, совокупный отклик метаболических реакций может быть оценен по отношению к необработанной почве (контролю) как растущее сокращение запасов метаболически активной микробной биомассы [7]. Величина биомассы, при лимите углерода в условиях проведения эксперимента, определяется воздействием химиката и не может превысить уровень контроля. Следовательно, нарушения, вызванные тестируемым веществом, всегда отчетливо проявятся к концу эксперимента.
3.4. Данный тест разработан прежде всего для веществ с предсказуемой дозой внесения, например, средств защиты растений, для которых способ применения и дозы известны. Для агрохимикатов достаточно тестирования двух доз, соответствующих и превышающих рекомендованную норму применения. Агрохимикаты могут тестироваться в виде действующих веществ или препаративных форм.
Однако данный тест не ограничивается агрохимикатами, норма применения которых известна. Изменяя количество тестируемого вещества, вносимого в почву, и способ его применения, тест может быть проведен с химикатами, для которых предполагаемая доза внесения в почву не известна. Так, для веществ, не относящихся к агрохимикатам, проводится тестирование трансформации углерода в серии концентраций. Результаты теста используют для построения зависимости проявления эффекта от дозы внесения и рассчитывают величину ECx, где x определяет % воздействия.
4. Принцип теста
Просеянную почву обрабатывают тестируемым веществом, а необработанная почва служит контролем. При исследовании агрохимикатов выбирают как минимум две концентрации, принимая во внимание максимальную предполагаемую дозу их полевого применения. Через 0, 7, 14 и 28 сут инкубации образцы обработанной и контрольной почв обогащают глюкозой и измеряют в течение 12 ч интенсивность дыхания, индуцированного глюкозой. Интенсивность дыхания выражают как эмиссию диоксида углерода (мг CO2/кг сухой почвы в час) или скорости поглощения кислорода (мг O2/кг сухой почвы в час).
Значения интенсивности дыхания в образцах с внесением исследуемого вещества сравнивают с контролем и рассчитывают отклонение в процентах от контроля. Продолжительность эксперимента не менее 28 сут. Если в течение 28 сут разница между опытными и контрольными вариантами достигает или превышает 25%, исследование продолжают с 14-дневным интервалом максимум до 100 сут.
При тестировании не агрохимикатов допускается определение интенсивности дыхания, индуцированного глюкозой (по количеству выделившегося диоксида углерода или поглощенного кислорода) в опытных и контрольных образцах почв через 28 сут инкубации. Результаты эксперимента с различными концентрациями обрабатывают с использованием регрессионной модели и представляют в виде ECx (например, EC50, EC25 и/или EC10).
5. Достоверность теста
Оценка результатов тестирования агрохимикатов основана на относительно небольших отклонениях (среднее значение составляет +/- 25%) интенсивности выделения диоксида углерода или поглощения кислорода в тестируемой и контрольной пробах почвы, поэтому большие различия в результатах параллельных
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>
