Утвержден и введен в действие
Приказом Федерального
агентства по техническому
регулированию и метрологии
от 20 октября 2016 г. N 1454-ст
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ТРЕБОВАНИЯ
К КАЧЕСТВУ И БЕЗОПАСНОСТИ ПЦР-НАБОРОВ, ПРОВЕДЕНИЮ
ИССЛЕДОВАНИЙ И ИСПЫТАНИЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕТОДА
ПЦР ПРИ ИДЕНТИФИКАЦИИ ЦЕЛЕВЫХ ТАКСОНОВ МИКРОФЛОРЫ,
РАСТЕНИЙ И ГЕНЕТИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫХ ОРГАНИЗМОВ
Requirements for the quality and safety of PCR
kits, research and testing using the PCR method
in the identification of the target taxa
of microorganisms, plants and genetically
modified organisms
ГОСТ Р 57175-2016
ОКС 11.100
Дата введения
1 сентября 2017 года
Предисловие
1 РАЗРАБОТАН Ассоциацией "Биологическая экологическая и продовольственная безопасность"
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 447 "Биологическая безопасность пищевых продуктов, кормов и товаров народного потребления"
3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 20 октября 2016 г. N 1454-ст
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Правила применения настоящего стандарта установлены в ГОСТ Р 1.0-2012 (раздел 8). Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе "Национальные стандарты", а официальный текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)
Введение
Настоящий стандарт устанавливает требования к обеспечению подтверждения достоверности результатов идентификации микрофлоры, растений и генетически модифицированных организмов, качеству проведения амплификации нуклеиновых кислот (этап идентификации), качеству ПЦР-наборов, предназначенных для идентификации в лабораторных условиях. Несоблюдение этих требований может привести к искажениям результатов исследований, некачественному оказанию услуг, введению в заблуждение и обману потребителя, ухудшению качества жизни населения и нанесению вреда окружающей среде.
Настоящий стандарт разработан для организаций, применяющих ПЦР-наборы или методы амплификации нуклеиновых кислот с использованием ПЦР-наборов при проведении испытаний и исследований по идентификации целевых таксонов микрофлоры, растений и генетически модифицированных организмов и при самостоятельном тестировании ПЦР-наборов.
Настоящий стандарт также регламентирует требования к организации, качеству и безопасности идентификации, испытаний и исследований с использованием ПЦР-наборов при мониторинге объектов и оказании услуг физическим и юридическим лицам.
1 Область применения
Стандарт распространяется на организации, испытательные и исследовательские лаборатории, проводящие исследования и испытания по идентификации целевых таксонов микрофлоры, растений и генетически модифицированных организмов с использованием ПЦР-наборов, занимающихся природоохранным и экологическим мониторингом, мониторингом биорисков, оказанием услуг населению и организациям, подтверждением соответствия заявленным показателям качества и безопасности, микробиологическими испытаниями и исследованиями пищевой продукции, почвы, воды, кормов для животных и других объектов и продукции, проведением контрольных тестов и проверок в целях обеспечения качества этих испытаний и исследований.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ 2.601 Единая система конструкторской документации. Эксплуатационные документы
ГОСТ 16504 Система государственных испытаний продукции. Испытания и контроль качества продукции. Основные термины и определения
ГОСТ Р 8.691 Государственная система обеспечения единства измерений. Стандартные образцы материалов (веществ). Содержание паспортов и этикеток
ГОСТ Р 52174 Биологическая безопасность. Сырье и продукты пищевые. Метод идентификации генетически модифицированных источников (ГМИ) растительного происхождения с применением биологического микрочипа
ГОСТ Р 52833 Микробиология пищевой продукции и кормов для животных. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для определения патогенных микроорганизмов. Общие требования и определения
ГОСТ Р 53244 Продукты пищевые. Методы анализа для обнаружения генетически модифицированных организмов и полученных из них продуктов. Методы, основанные на количественном определении нуклеиновых кислот
Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана недатированная ссылка, то рекомендуется использовать действующую версию этого стандарта с учетом всех внесенных изменений. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, то рекомендуется использовать версию этого стандарта с указанным выше годом утверждения (принятия). Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение рекомендуется применять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, рекомендуется применять в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Термины и определения
В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:
3.1 амплификация нуклеиновых кислот: Метод, позволяющий увеличить многократно число копий фрагмента нуклеиновых кислот (ДНК/(кДНК)/РНК).
3.2 ГСО: Стандартный образец утвержденного типа [1].
3.3 ДНК: Дезоксирибонуклеиновая кислота.
3.4 Идентификация с использованием метода ПЦР: Выявление нуклеотидных последовательностей, строго специфичных для целевого таксона организма, с использованием методов амплификации нуклеиновых кислот.
3.5 ПЦР: Полимеразная цепная реакция - метод молекулярной биологии, позволяющий увеличить малые концентрации определенных фрагментов ДНК и РНК в биологическом материале.
3.6 ПЦР-набор: Набор (тест-система), состоящий из праймеров и реагентов для проведения ПЦР.
3.7 Тест-ПЦР-набор: ГСО специфических (видоспецифичных) ДНК или РНК фрагментов, имеющих 100%-ную идентичность с тестируемым участком генома идентифицируемого объекта, с реагентами для проведения и контроля ПЦР.
3.8 чувствительность: Минимальное количество биологического материала представителя целевого таксона (отдельных видов микроорганизмов, растений, линий или штаммов генетически модифицированных организмов), необходимое для его идентификации.
3.9 специфичность: Способность определить наличие в образце только того объекта, для выявления которого был разработан ПЦР-набор.
3.10 положительный контрольный образец: Индикатор работы амплификационной смеси и маркер длины специфических ПЦР-фрагментов нуклеиновых кислот, соответствующих определяемому организму.
3.11 отрицательный контрольный образец: Образец для оценки возможной контаминации реактивов для выделения ДНК, включающий в качестве матрицы ДНК организмов, близкородственных определяемому данным ПЦР-набором.
3.12 положительный контроль ПЦР: Образец для контроля качества амплификационных реактивов, включающий в качестве матрицы ДНК организмов с секвенированным геномом и специфические праймеры к участку геномной ДНК этого организма.
3.13 отрицательный контроль ПЦР: Образец для контроля контаминации амплификационных реактивов, включающий деионизированную воду.
4 Общие положения
4.1 Организация и проведение испытаний и исследований с использованием метода ПЦР должны соответствовать требованиям настоящего стандарта, отвечать интересам потребителя, быть безопасными для жизни и здоровья населения и окружающей среды.
4.2 Для ПЦР-наборов должна быть предоставлена полная информация об их комплектации и дана полная характеристика каждого компонента ПЦР-набора.
4.3 ПЦР-наборы должны включать все необходимые реагенты, и их качество должно обеспечивать высокую чувствительность и специфичность системы амплификации. ПЦР-наборы должны обеспечивать воспроизводимость результатов амплификации для идентификации объекта тестирования.
4.4 ПЦР-наборы должны иметь документальное подтверждение указанным в их сопроводительной документации характеристикам.
При использовании Тест-ПЦР-наборов для самостоятельного тестирования по каждому из них должна быть предоставлена полная информация о составе и метрологических характеристиках [1].
4.5 Проведение испытаний и исследований с помощью Тест-ПЦР-набора должно соответствовать требованиям по охране окружающей среды, установленным соответствующим Федеральным законом [2].
4.6 Требования настоящего стандарта распространяются на организации и предприятия независимо от их организационно-правовой формы.
4.7 Соответствие качеству и безопасности ПЦР-наборов подтверждается их производителем.
4.8 Не допускается использование ПЦР-наборов, не соответствующих требованиям настоящего стандарта.
5 Требования к организации и проведению испытаний и исследований
5.1 Организации, использующие в своей деятельности идентификацию микрофлоры, растений, генетически модифицированных организмов с использованием метода ПЦР, должны иметь необходимые правоустанавливающие документы на данный вид деятельности в соответствии с законодательством Российской Федерации.
5.2 Общие требования к проведению испытаний регламентируются ГОСТ 16504.
5.3 Нуклеиновая кислота, экстрагированная из каждой анализируемой пробы, должна быть проанализирована не менее чем в двух повторностях. Концентрация анализируемой последовательности нуклеиновой кислоты должна находиться внутри динамического диапазона ПЦР-набора.
Примечание - Для определения качества нуклеиновой кислоты (по длине и структурной целостности), а также ее чистоты и количества для обеспечения обнаружения целевого таксона может быть проведен контроль, специфический для целевого таксона. Он может быть тем более обоснован, когда нуклеиновая кислота экстрагирована из композитного или подвергнувшегося глубокой обработке материала.
5.4 Результат испытаний следует определять только качественно (в анализируемой пробе нуклеиновая кислота из целевого таксона присутствует).
5.5 Качественное определение состоит:
- из амплификации одной или большего числа специфических целевых последовательностей;
- обнаружения и подтверждения специфичности продукта(ов) ПЦР.
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>
