Утвержден и введен в действие
Приказом Федерального
агентства по техническому
регулированию и метрологии
от 13 декабря 2011 г. N 804-ст
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
МЕД НАТУРАЛЬНЫЙ
МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИБИОТИКОВ
Natural honey. Method for determination of antibiotics
ГОСТ Р 54655-2011
Группа С52
ОКС 67.180.10
ОКСТУ 9101
Дата введения
1 января 2013 года
Предисловие
Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация Российской Федерации. Основные положения".
Сведения о стандарте
1. Разработан Государственным научным учреждением Научно-исследовательским институтом пчеловодства Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ НИИ пчеловодства Россельхозакадемии) и Обществом с ограниченной ответственностью "Аналитический центр Апис".
2. Внесен Техническим комитетом по стандартизации ТК 432 "Пчеловодство".
3. Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 13 декабря 2011 г. N 804-ст.
4. Введен впервые.
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.
1. Область применения
Настоящий стандарт распространяется на натуральный мед и устанавливает метод определения остаточных количеств антибиотиков тетрациклиновой группы и левомицетина (хлорамфеникола) (далее - ХАФ) на основе твердофазного иммуноферментного анализа (далее - ИФА).
Пределы обнаружения составляют:
- для тетрациклина, ролитетрациклина - 6 мкг/кг;
- левомицетина - 0,025 мкг/кг.
2. Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ Р 12.1.019-2009 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения
ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике
ГОСТ Р 51568-99 (ИСО 3310-1-90) Сита лабораторные из металлической проволочной сетки. Технические условия
ГОСТ Р 52501-2005 (ИСО 3696:1987) Вода для лабораторного анализа. Технические условия
ГОСТ Р 53228-2008 Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания
ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования
ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание
ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 3145-84 Часы механические с сигнальным устройством. Общие технические условия
ГОСТ 4233-77 Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия
ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия
ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
ГОСТ 14919-83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия
ГОСТ 16317-87 Приборы холодильные электрические бытовые. Общие технические условия
ГОСТ 19792-2001 Мед натуральный. Технические условия
ГОСТ 19881-74 Анализаторы потенциометрические для контроля pH молока и молочных продуктов. Общие технические условия
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
Примечание. При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3. Термины и определения
В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ 19792, ГОСТ Р ИСО 5725-1, а также следующие термины с соответствующими определениями:
3.1. Антибиотики: широкий спектр антимикробных ветеринарных препаратов (в т.ч. тетрациклины, левомицетин), используемых для профилактики и лечения инфекционных заболеваний пчел.
3.2. Остаточное количество антибиотика в меде: массовая доля остатка антибиотика в меде, выражают в микрограммах на килограмм.
3.3. Иммуноферментный анализ; ИФА (enzyme-linked immunosorbent assay; ELISA): лабораторный иммунологический метод качественного определения и количественного измерения антигенов и антител.
4. Требования безопасности
4.1. Требования электробезопасности при работе с приборами - по ГОСТ Р 12.1.019.
4.2. Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.
4.3. При выполнении анализов необходимо соблюдать требования безопасности при работе с химическими реактивами согласно ГОСТ 12.1.007.
5. Отбор и подготовка пробы меда
5.1. Отбор проб - по ГОСТ 19792.
5.2. Закристаллизованный мед размягчают на водяной бане, предназначенной для равномерного обогрева с помощью трубчатых электрических нагревательных элементов мощностью не более 1000 Вт, напряжение сети 220 В, диапазон регулировки температуры от 20 °C до 100 °C, или в сушильном шкафу по ГОСТ 14919 при температуре не выше 40 °C и продавливают металлическим или пластмассовым шпателем с длиной рабочей поверхности не менее 20 мм через сито по ГОСТ Р 51568. Крупные механические частицы удаляют вручную.
5.3. Сотовый мед распечатывают, отделяют от сот с помощью металлического сита без нагревания.
6. Определение присутствия и массовой доли
антибиотиков тетрациклиновой группы
6.1. Сущность метода
Базовым принципом для количественного определения антибиотиков тетрациклиновой группы в меде является твердофазный конкурентный ИФА на планшетах из полистирола. Метод основан на конкуренции свободного антибиотика из меда и антибиотика, предварительно адсорбированного на твердой фазе (лунке планшета) в составе белкового конъюгата, за центры связывания специфичных к тетрациклинам антител во вносимом растворе. После отделения несвязавшихся реагентов количество антител, прореагировавших с иммобилизованным антигеном, определяют с помощью вторичных антивидовых антител, меченных пероксидазой хрена. Количество связавшегося с антителами конъюгата вторичных антител определяют с помощью субстрат-хромогенной смеси. Количество определяемого антибиотика, содержащегося в анализируемой пробе, обратно пропорционально регистрируемой оптической плотности продукта ферментативной реакции.
6.2. Средства измерений, вспомогательные устройства, посуда, материалы и реактивы
6.2.1. Фотометр микропланшетный вертикального сканирования с фильтрами, соответствующими длине волны 450 нм.
6.2.2. Дозаторы пипеточные автоматические с переменным объемом дозирования 0,010 - 0,100 см3; 0,100 - 1,000 см3 и 1,000 - 5,000 см3 одноканальные.
6.2.3. Дозаторы пипеточные автоматические восьмиканальные с переменным объемом дозирования 0,050 - 0,300 см3.
6.2.4. Наконечники для автоматических пипеток вместимостью от 0,300 до 1,000 и до 5,000 см3 однократного применения.
6.2.5. Анализатор потенциометрический с пределом допускаемой основной погрешности измерений +/- 0,01 ед. pH по ГОСТ 19881.
6.2.6. Весы по ГОСТ Р 53228 с пределами допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более +/- 0,1 мг и не более +/- 0,002 г.
6.2.7. Шейкер лабораторный для пробирок.
6.2.8. Часы механические с сигнальным устройством по ГОСТ 3145.
6.2.9. Центрифуга настольная с эффективностью не менее 3000 g или иного типа с теми же характеристиками.
6.2.10. Ультразвуковая ванна с эффективной мощностью ультразвука 60 Вт.
6.2.11. Аппарат универсальный для встряхивания.
6.2.12. Стаканы химические вместимостью 50, 100 см3 по ГОСТ 25336.
6.2.13. Колбы мерные вместимостью 1000 см3 по ГОСТ 1770.
6.2.14. Цилиндры мерные 2-25-1 по ГОСТ 1770.
6.2.15. Набор реагентов для количественного определения тетрациклина типа "Ридаскрин Тетрациклин".
6.2.16. Натрий фосфорнокислый 2-замещенный 2-водный с массовой долей основного вещества не менее 98%.
6.2.17. Натрий фосфорнокислый 1-замещенный 1-водный с массовой долей основного вещества не менее 98%.
6.2.18. Натрий хлористый по ГОСТ 4233.
6.2.19. Натрия гидроокись по ГОСТ 4328.
6.2.20. Вода для лабораторного анализа категории 1 по ГОСТ Р 52501.
6.2.21. Твин 20, имп.
6.2.22. Стеклянные виалы вместимостью 1,5; 80 см3 с завинчивающимися крышками.
6.2.23. Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>
