Введен в действие
Приказом Федерального агентства
по техническому регулированию
и метрологии
от 30 августа 2016 г. N 970-ст
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
КОРМА
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДЕЗОКСИНИВАЛЕНОЛА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ
ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ (ВЭЖХ) С ОЧИСТКОЙ
НА ИММУНОАФФИННОЙ КОЛОНКЕ
Animal feed. Determination of deoxynivalenol by high
performance liquid chromatographic (HPLC) method
with immunoaffinity column clean-up
(EN 15791:2009 Foodstuffs - Determination of Deoxynivalenol
in animal feed - HPLC method with immunoaffinity column
clean-up, IDT)
ГОСТ EN 15791-2015
МКС 65.120
Дата введения
1 июля 2017 года
Предисловие
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 1.0-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"
Сведения о стандарте
1 ПОДГОТОВЛЕН Научно-производственным республиканским унитарным предприятием "Белорусский государственный институт стандартизации и сертификации" (БелГИСС) на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии европейского стандарта, указанного в пункте 5
2 ВНЕСЕН Государственным комитетом по стандартизации Республики Беларусь
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 27 февраля 2015 г. N 75-П)
За принятие стандарта проголосовали:
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Армения AM Минэкономики Республики Армения
Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь
Киргизия KG Кыргызстандарт
Молдова MD Молдова-Стандарт
Россия RU Росстандарт
Таджикистан TJ Таджикстандарт
Узбекистан UZ Узстандарт
4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 августа 2016 г. N 970-ст межгосударственный стандарт ГОСТ EN 15791-2015 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2017 г.
5 Настоящий стандарт идентичен европейскому стандарту EN 15791:2009 "Продукция пищевая. Определение дезоксиниваленола в кормах для животных. Метод ВЭЖХ с очисткой на иммуноаффинной колонке" ("Foodstuffs - Determination of Deoxynivalenol in animal feed - HPLC method with immunoaffinity column clean-up", IDT).
Европейский стандарт разработан Техническим комитетом по стандартизации CEN/TC 327 "Корма" Европейского комитета по стандартизации (CEN).
В разделе "Нормативные ссылки" и тексте стандарта ссылки на европейский стандарт актуализированы.
Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного европейского стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5 (подраздел 3.6).
При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочного европейского стандарта соответствующий ему межгосударственный стандарт, сведения о котором приведены в дополнительном приложении ДА
6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)
1. Область применения
Настоящий стандарт распространяется на метод определения дезоксиниваленола (ДОН) в комбикормах при концентрациях от 150 до 4000 мкг/кг.
2. Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы ссылки на межгосударственные стандарты, которые являются обязательными. Для датированных ссылок применяют только указанное издание. Для недатированных ссылок применяют последнее издание ссылочного стандарта (включая все его изменения).
EN ISO 3696:1995 Water for analytical laboratory use. Specification and test methods (Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний)
3. Сущность метода
Дезоксиниваленол (ДОН) экстрагируют из продукта, используя воду. Затем водный экстракт очищают на иммуноаффинной колонке, чтобы удалить примеси из пробы. Затем ДОН количественно определяют методом ВЭЖХ с ультрафиолетовым детектором.
4. Реактивы
Для проведения анализа, если не указано иное, используют только реактивы признанной аналитической чистоты и воду не ниже первой степени чистоты по EN ISO 3696. Качество растворителей должно соответствовать требованиям растворителей для ВЭЖХ.
4.1 Ацетонитрил
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Ацетонитрил опасен, поэтому работать с ним необходимо в вытяжном шкафу. Необходимо использовать средства индивидуальной защиты (лабораторный халат, очки, перчатки).
4.2 Дезоксиниваленол (ДОН), чистотой не менее 97%
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Дезоксиниваленол высокотоксичен. Все время необходимо носить перчатки и очки, а все работы по подготовке пробы и стандартного образца необходимо выполнять в вытяжном шкафу.
4.3 Метанол
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Метанол опасен, поэтому работать с ним необходимо в вытяжном шкафу. Необходимо использовать средства индивидуальной защиты (лабораторный халат, очки, перчатки).
4.4 Ледяная уксусная кислота
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - Ледяная уксусная кислота опасна, поэтому работать с ней необходимо в вытяжном шкафу. Необходимо носить соответствующие средства защиты (лабораторный халат, очки, перчатки).
4.5 Подвижная фаза
Смешивают 15 объемных частей метанола (4.3) с 84,9 объемной части воды и 0,1 объемной части ледяной уксусной кислоты (4.4). Точное количество используемого метанола и необходимость использования уксусной кислоты зависят от выбранной для анализа ВЭЖХ колонки. При необходимости регулируют количество метанола. Дегазируют раствор перед его применением.
4.6 Промывной растворитель
Смешивают 50 объемных частей метанола (4.3) с 50 объемными частями воды.
4.7 Исходный раствор ДОН
Раствор содержит 250 мкг дезоксиниваленола на 1 см3 ацетонитрила.
Раствор можно приготовить следующим образом: добавляют 4,0 мл ацетонитрила (4.1) в 5 мг ДОН (4.2) для получения раствора с концентрацией 1,25 мг/см3. Разбавляют 1000 мкл раствора с концентрацией 1,25 мг/см3 до 5 см3 ацетонитрилом для получения исходного раствора с концентрацией 250 мкг/см3. Разбавляют 200 мкл исходного раствора с концентрацией 250 мкг/см3 в мерной колбе вместимостью 2,0 см3 (5.11) ацетонитрилом, чтобы получить разбавленный исходный раствор с концентрацией 25 мкг/см3.
Для того чтобы определить точную концентрацию, измеряют значения оптической плотности данного разбавленного исходного раствора с концентрацией 25 мкг/см3 при помощи спектрофотометра (5.15) в диапазоне 200 - 270 нм в кварцевой кювете с оптической длиной пути 1 см, а в качестве эталона используют ацетонитрил (4.1). Измеряют оптическую плотность при 220 нм. Рассчитывают массовую концентрацию дезоксиниваленола , по формуле
, (1)
где Aмакс - оптическая плотность, измеренная при максимальном значении на кривой оптической плотности (220 нм);
M - молярная масса дезоксиниваленола (M = 296,3 г/моль);
k - молярный коэффициент поглощения дезоксиниваленола в ацетонитриле (4.1), (681,0 +/- 12,6) м2/моль) ([1]);
d - оптическая длина пути кварцевой кюветы, см (1 см).
Рассчитывают точную концентрацию исходного раствора с концентрацией 250 мкг/мл по следующей формуле
. (2)
Исходный раствор хранят в темном месте не более 3 мес при температуре 4 °C - 8 °C или не более 6 мес при температуре ниже минус 18 °C.
Примечание - Приготовление исходного раствора можно выполнять гравиметрически, при этом точно взвешивают стандартный образец ДОН и растворитель, используемый для его растворения.
4.8 Раствор для обогащения дезоксиниваленолом
Пипеткой переносят аликвоту исходного раствора ДОН (4.7), эквивалентную 500 мкг ДОН, в мерную колбу вместимостью 5 см3 (5.11). Объем содержимого в колбе доводят до метки ацетонитрилом (4.1). Получают обогащающий раствор с концентрацией 100 мкг/см3.
4.9 Рабочий раствор ДОН
Пипеткой переносят аликвоту разбавленного исходного раствора ДОН (4.7), эквивалентную 50 мкг ДОН, в мерную колбу вместимостью 5 см3 (5.11). Объем содержимого в колбе доводят до метки ацетонитрилом (4.1). Получают рабочий раствор ДОН с концентрацией 10 мкг/см3.
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>
