Введен в действие
Приказом Федерального
агентства по техническому
регулированию и метрологии
от 23 сентября 2016 г. N 1207-ст
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
МОЛОКО
ПОДСЧЕТ СОМАТИЧЕСКИХ КЛЕТОК
ЧАСТЬ 1
МЕТОД С ПРИМЕНЕНИЕМ МИКРОСКОПА (КОНТРОЛЬНЫЙ МЕТОД)
Milk. Enumeration of somatic cells. Part 1.
Microscopic method (reference method)
(ISO 13366-1:2008/IDF 148-1:2008, IDT)
ГОСТ ISO 13366-1-2014
МКС 67.100.10
Дата введения
1 июля 2017 года
Предисловие
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"
Сведения о стандарте
1 ПОДГОТОВЛЕН Научно-производственным республиканским унитарным предприятием "Белорусский государственный институт стандартизации и сертификации" (БелГИСС) на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии международного стандарта, указанного в пункте 5
2 ВНЕСЕН Государственным комитетом по стандартизации Республики Беларусь
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 25 июня 2014 г. N 45-2014)
За принятие проголосовали:
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Армения AM Минэкономики Республики Армения
Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь
Казахстан KZ Госстандарт Республики Казахстан
Киргизия KG Кыргызстандарт
Молдова MD Молдова-Стандарт
Россия RU Росстандарт
Таджикистан TJ Таджикстандарт
Узбекистан UZ Узстандарт
4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 23 сентября 2016 г. N 1207-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 13366-1-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2017 г.
5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 13366-1:2008/IDF 148-1:2008 "Молоко. Подсчет соматических клеток. Часть 1. Метод с применением микроскопа (контрольный метод)" ("Milk - Enumeration of somatic cells - Part 1: Microscopic method (reference method)", IDT), включая техническую поправку к нему Cor. 1:2009.
Международный стандарт ISO 13366-1:2008/IDF 148-1:2008 разработан подкомитетом SC 5 "Молоко и молочные продукты" Технического комитета по стандартизации ISO/TC 34 "Пищевые продукты" Международной организации по стандартизации (ISO) и Международной молочной федерацией (IDF).
Официальные экземпляры международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, и международных стандартов, на которые даны ссылки, имеются в Федеральном информационном фонде технических регламентов и стандартов.
В тексте стандарта ссылки на международные стандарты актуализированы
6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)
1. Область применения
Настоящий стандарт устанавливает метод определения количества соматических клеток в сыром и химически консервированном молоке.
Метод применяется для подсчета соматических клеток в коровьем молоке, при условии, что обнаружены предпосылки их присутствия.
Стандарт допускается применять для подготовки стандартных проб при калибровке механизированных и автоматизированных способов подсчета клеток.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ - При применении настоящего стандарта могут использоваться опасные вещества и оборудование. Настоящий стандарт не предусматривает рассмотрения всех проблем безопасности, связанных с его применением. Ответственность за соблюдение техники безопасности и охраны здоровья, а также установление соответствующих ограничений по применению настоящего стандарта несет пользователь.
2. Термины и определения
В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:
2.1 соматические клетки (somatic cells): Клетки с ядрами, то есть все лейкоциты и эпителиальные клетки, определяемые в соответствии с методом, приведенным в настоящем стандарте.
3. Сущность метода
Анализируемую пробу молока распределяют тонким слоем на предметном стекле, получая мазок. Мазок подсушивают и окрашивают, затем под микроскопом подсчитывают количество окрашенных клеток. Для определения количества клеток в 1 см3 пробы число клеток, подсчитанное на четко установленной площади, умножают на рабочий коэффициент.
4. Реактивы
Используют реактивы только признанной аналитической чистоты, если нет других указаний, дистиллированную или деминерализованную воду или воду, эквивалентную по чистоте.
4.1. Растворы красителей
Предупреждение - Тетрахлорэтан - яд. Этидиум бромид - мутагенное вещество. В случае проливания необходимо немедленно принять меры по обезвреживанию. Приготовление и применение красящих растворов необходимо проводить в вытяжном шкафу, используя средства индивидуальной защиты.
4.1.1 Модифицированный окрашивающий раствор Newman-Lampert (модификация Lewowitz-Weber)
4.1.1.1 Состав
Этанол с объемной долей спирта 95%, см3 54,0
Тетрахлорэтан, см3 40,0
Метиленовый синий, г 0,6
Ледяная уксусная кислота, см3 6,0
Примечание - Допускается применять ксилол в том же объеме, какой указан для тетрахлорэтана.
4.1.1.2 Приготовление
В колбе смешивают этанол и тетрахлорэтан, укупоривают пробкой. Смесь нагревают на водяной бане (см. 5.1) до температуры 65 °C. Добавляют метиленовый голубой в вытяжном шкафу и тщательно перемешивают. Раствор охлаждают в холодильнике до 4 °C.
Затем добавляют ледяную уксусную кислоту и вновь тщательно перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр (см. 5.2) в герметичную колбу на хранение.
Перед использованием окрашивающий раствор Newman-Lampert снова фильтруют.
4.1.2 Окрашивающий раствор бромида этидия
4.1.2.1 Основной окрашивающий раствор
4.1.2.1.1 Состав
Бромид этидия, г 0,25
Деминерализованная вода, см3 100
4.1.2.1.2 Приготовление основного окрашивающего раствора
Бромид этидия растворяют в деминерализованной воде, предварительно нагретой до 40 °C. Охлаждают раствор до комнатной температуры. Доводят до 100 см3 деминерализованной водой.
Основной окрашивающий раствор бромида этидия хранят не более двух месяцев в темном месте при температуре (2 +/- 2) °C.
4.1.2.2 Буферный раствор
4.1.2.2.1 Состав
Гидрофталат калия, г 0,51
Гидроксид калия, г 0,162
Деминерализованная вода, см3 100
4.1.2.2.2 Приготовление буферного раствора
Гидрофталат калия и гидроксид калия растворяют раздельно в деминерализованной воде.
Буферный раствор хранят в темном месте при температуре (2 +/- 2) °C не более 2 мес.
4.1.2.3 Рабочий окрашивающий раствор бромида этидия
4.1.2.3.1 Компоненты
Красящий основной раствор бромида этидия (см. 4.1.2.1), см3 2
Буферный раствор (см. 4.1.2.2), см3 8
Для просмотра документа целиком скачайте его >>>